植物類黃酮含量檢測試劑盒說明書
規(guī)格:100T/48S
類黃酮是一類多苯化合物,屬于植物次生代謝物,對人體具有消炎,抗菌,降血脂,清除體內(nèi)羥自由基,預(yù)防癌癥等作用。
天平、烘箱、粉碎儀、篩子、超聲破碎儀、60%乙醇、離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96 孔板、蒸餾水。
一、測定操作表
1、 分光光度計或酶標儀預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長至 470nm,蒸餾水調(diào)零。
2、 操作表
| 對照管 | 測定管 | 標準管 | 空白管 |
樣本待測液(µL) | 60 | 60 |
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標準溶液(μL) |
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| 60 |
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蒸餾水(μL) |
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| 60 |
試劑一(µL) | 15 | 15 | 15 | 15 |
混勻,室溫靜置 5min | ||||
試劑二(µL) |
| 15 | 15 | 15 |
混勻,室溫靜置 5min | ||||
試劑三(µL) | 120 | 120 | 120 | 120 |
60%乙醇(µL) | 105 | 90 | 90 | 90 |
混勻,37℃水浴 45 min,10000g,10min 離心取上清,取 200µL 于微量玻璃比色皿/96 孔板中測定 A470。計算ΔA=A 測定-A 對照,ΔAˊ=A 標準-A 空白。 |
1、 標準曲線繪制
以單寧酸濃度為橫坐標,ΔAˊ為縱坐標繪制標準曲線 y=kx+b,將ΔA 帶入方程求得 x; 2、 按樣本鮮重計算
類黃酮含量(mg/g 鮮重)= x×V 提取÷W=x÷W 3、 按樣本蛋白濃度計算
類黃酮含量(mg/ mg prot)= x×V 提取÷(Cpr×V 提取) = x÷Cpr
V 提?。杭尤胩崛∫后w積,1mL;W:樣本鮮重,g;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL。
1、 OD 值大于 0.4,樣品適當稀釋再測定,注意計算公式里乘以稀釋倍數(shù)。
2、 顯色完成后立即測定,2 小時后吸光值會下降。
實驗代做服務(wù):
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