蛋白銀染試劑盒說明書
Protein Silver Stain Kit
蛋白銀染試劑盒
目錄號:K2012
保存條件:室溫保存。
組分說明
Cat. No. K2012
Kit Size 20次
Silver Stain Sensitizer(500×) 2×1 ml
Silver Stain Enhancer 3ml
Silver Stain 2×250 ml
Silver Stain Developer 4×125 ml
產(chǎn)品簡介
本試劑盒采用高靈敏度的銀染染料,可應(yīng)用于變性膠及非變性膠的蛋白染色,具
有目的條帶清晰、背景低,操作時間可靈活控制的優(yōu)點。另外,本試劑盒增加了一步
短時敏化作用步驟,可明顯降低背景及提升目的條帶的亮度。
注意事項
1.操作時請使用去離子水和潔凈的玻璃或塑料器皿,須戴一次性手套進行操作。
2.整個銀染過程需在搖床上進行,搖床轉(zhuǎn)速約60 rpm左右。
3.需自備乙醇,冰醋酸。
本產(chǎn)品僅供科研使用,請勿用于臨床診斷及其他用途
使用說明
以下操作步驟中各溶液的用量以大小為8.5×5.5 cm、厚度為1.0 mm的凝膠為例,以凝膠全部浸沒到溶液為準,一般用量25 ml。對于大型凝膠,各溶液的使用量需按凝膠體
積的比列放大。請?zhí)崆皽蕚浜?0 ml固定液(超純水:乙醇:冰醋酸=6:3:1)、50 ml洗脫液(10%乙醇)和50 ml終止液(5%的冰醋酸)。
1.水洗:電泳完成后,用超純水洗膠2次,每次洗滌5分鐘。
2.固定:用25 ml固定液固定凝膠2次,每次固定15分鐘。
3.洗脫:固定完成后用洗脫液洗膠2次,每次洗滌5分鐘。
4.水洗:用超純水洗膠2次,每次洗滌5分鐘。
5.增敏:將上一步洗好的凝膠置于銀染增敏工作液中,室溫下準確孵育1分鐘后用超純水洗膠3次,每次洗滌20秒。
銀染增敏工作液的配制:取50 µl Silver Stain Sensitizer(500×)加入到25 ml超純水中,混勻。
6.銀染:棄去超純水,將凝膠置于銀染工作液中孵育30分鐘。
銀染工作液的配制:取25ml Silver Stain加入50 µl Silver Stain Enhancer混勻。
7.水洗:用超純水快速洗膠2次,每次洗滌準確控制為20秒。
8.顯影:立即將洗好的凝膠浸沒在顯影液中,室溫孵育2-3分鐘,直至蛋白條帶顯示清晰。
顯影液的配制:取25ml Silver Stain Developer加入30µl Silver Stain Enhancer混勻。
注意:顯影30秒內(nèi),蛋白條帶開始顯現(xiàn),繼續(xù)顯影至2-3分鐘。若蛋白條帶顯色較淺,可適當延長顯影時間至5分鐘及以上。
9.終止:用終止液洗去凝膠上的顯影液后,將凝膠浸泡在新的終止液中反應(yīng)10分鐘。
實驗代做服務(wù):
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