更新時(shí)間: | 2018-06-20 |
訪問量: | 1010 |
廠商性質(zhì): | 生產(chǎn)廠家 |
胰蛋白酶(Trypsin)是由胰臟產(chǎn)生沒有活性的胰蛋白酶原分泌到小腸后,小腸內(nèi)的腸肽酶會(huì)活化該酶原,形成胰蛋白酶。
胰蛋白酶-EDTA 溶液(0.05%:0.02%,含酚紅)
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
胰蛋白酶(Trypsin)是由胰臟產(chǎn)生沒有活性的胰蛋白酶原分泌到小腸后,小腸內(nèi)的腸肽酶會(huì)活化該酶原,形成胰蛋白酶。胰蛋白酶的特點(diǎn)在于已經(jīng)活化的胰蛋白酶,能夠繼續(xù)活化
更多胰蛋白酶原,這種過程即自動(dòng)催化。胰蛋白酶在小腸工作,它會(huì)將蛋白質(zhì)水解為肽,進(jìn)而分解為氨基酸,其適溫度約為 37℃。
研謹(jǐn)生物Trypsin-EDTA solution(0.05%:0.02%,含酚紅)由 0.05%胰酶、0.02%EDTA、
少量酚紅等組成,經(jīng)過濾除菌。本試劑可以直接用于培養(yǎng)細(xì)胞的消化,或者一些組織的消化,通常室溫下 1~2min 左右就可以消化下大多數(shù)貼壁細(xì)胞。
產(chǎn)品組成:
Trypsin-EDTA solution(0.05%:0.02%,含酚紅) 100ml -20℃
自備材料:
1、 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液
2、 顯微鏡
3、 離心機(jī)
操作步驟(僅供參考):
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min,
不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除胰酶細(xì)胞消化液。加入含血清的*細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落,直接用胰酶細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量
去除胰酶細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化
不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
注意事項(xiàng):
1、 盡量減少反復(fù)凍融的次數(shù),以免失效。
2、在使用 Trypsin-EDTA solution 過程中,要特別注意避免消化液被細(xì)菌污染。3、Trypsin-EDTA solution 消化細(xì)胞時(shí)間不宜過長(zhǎng),否則細(xì)胞鋪板后生長(zhǎng)狀況會(huì)較差。
4、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
有效期: 12 個(gè)月有效。