更新時(shí)間: | 2021-03-01 |
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廠商性質(zhì): | 生產(chǎn)廠家 |
人白細(xì)胞介素-1(IL-1)ELISA試劑盒--打折銷售中,咨詢!
人白細(xì)胞介素-1(IL-1)ELISA試劑盒說明書
本試劑盒僅供研究使用。
名稱:
通用名:人白細(xì)胞介素-1(IL-1)酶聯(lián)免疫分析試劑盒
使用目的:
本試劑盒用于測(cè)定人血清,血漿及相關(guān)液體樣本中白細(xì)胞介素-1(IL-1)含量。
實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用間接法測(cè)定標(biāo)本中人白細(xì)胞介素-1(IL-1)水平。用純化的人白細(xì)胞介素-1(IL-1)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被抗體的微孔中依次加入已知濃度的白細(xì)胞介素-1(IL-1)標(biāo)準(zhǔn)品和未知濃度的白細(xì)胞介素-1(IL-1)待檢樣品,溫育后,加入生物素標(biāo)記的抗IgG抗體,再與鏈霉親和素-HRP結(jié)合,形成免疫復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白細(xì)胞介素-1(IL-1)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人白細(xì)胞介素-1(IL-1)濃度。
試劑盒組成
1 | 20倍濃縮洗滌液 | 50ml×1瓶 | 9 | 標(biāo)準(zhǔn)品S1(120 ng/L) | 0.5ml×1瓶 |
2 | 鏈霉親和素-HRP | 6ml×1瓶 | 標(biāo)準(zhǔn)品S2(80 ng/L) | 0.5ml×1瓶 | |
3 | 酶標(biāo)包被板 | 12孔×8條 | 標(biāo)準(zhǔn)品S3(40 ng/L) | 0.5ml×1瓶 | |
4 | 生物素標(biāo)記的抗-IgG抗體 | 6ml×1瓶 | 標(biāo)準(zhǔn)品S4(20 ng/L) | 0.5ml×1瓶 | |
5 | 顯色劑A液 | 6ml×1瓶 | 標(biāo)準(zhǔn)品S5(10 ng/L) | 0.5ml×1瓶 | |
6 | 顯色劑B液 | 6ml×1/瓶 | 10 | 密封袋 | 1個(gè) |
7 | 終止液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 | 3張 |
8 | 樣品稀釋液 | 6ml×1瓶 | 12 | 說明書 | 1份 |
標(biāo)本要求
1.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
2.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于
操作步驟
1. 根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品,生物素標(biāo)記的抗-IgG抗體,鏈霉親和素-HRP,其余各步與樣品操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測(cè)樣品孔。然后在標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品50μl,在樣本反應(yīng)孔中先加入待測(cè)樣品10μl再加入樣品稀釋液40μl(樣品終稀釋度為5倍),蓋上封板膜,輕輕振蕩混勻,
3. 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用
4. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)4次,拍干。
5. 加生物素標(biāo)記的抗-IgG抗體:每孔加入生物素標(biāo)記的抗-IgG抗體50μl。
6. 洗滌:操作同4。
7. 加鏈霉親和素-HRP:每孔加入50μl的鏈酶親和素-HRP,輕輕振蕩混勻,
8. 洗滌:操作同4。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A 50μl,再加入顯色劑B 50μl,輕輕震蕩混勻,
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
計(jì)算
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值待入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。
注意事項(xiàng)
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間較好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請(qǐng)先將樣本稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)后乘以稀釋倍數(shù)(×5×n)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。顯色劑B請(qǐng)避光保存。
7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。
規(guī)格:
96人份/盒
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:;2
2.有效期:6個(gè)月
實(shí)驗(yàn)代做服務(wù):
免疫組化IHC染色實(shí)驗(yàn)服務(wù) | 細(xì)胞、組織TUNEL凋亡染色實(shí)驗(yàn)服務(wù) | 試劑盒免費(fèi)代檢測(cè) | 實(shí)驗(yàn)室代做實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目
|
透射電鏡服務(wù)實(shí)驗(yàn)服務(wù) | 石蠟/冰凍切片TUNEL凋亡 | 核仁組成區(qū)嗜銀-AGNOR染色實(shí)驗(yàn)服務(wù) | 免疫共沉淀(CHIRP)實(shí)驗(yàn) |
RNA結(jié)合蛋白免疫沉淀(RIP)實(shí)驗(yàn)代做 | 酶聯(lián)免疫(ELISA)技術(shù)服務(wù) | 雞傳染性法氏囊病病毒VP2抗體診斷試劑盒 | 喹諾酮類快速檢測(cè)試劑盒 |
組織芯片/微陣列定制技術(shù)服務(wù)
| 染色質(zhì)免疫沉淀分析(CLIP)實(shí)驗(yàn)服務(wù)
| 多因子液相芯片技術(shù)(Luminex)實(shí)驗(yàn) | 免疫細(xì)胞化學(xué)ICC實(shí)驗(yàn)服務(wù) |
ATP/ADP檢測(cè)實(shí)驗(yàn)服務(wù) | 蛋白雙向(2-D)電泳實(shí)驗(yàn)服務(wù) | 蛋白相互作用分析 | 堿性磷酸酶染色實(shí)驗(yàn)服務(wù) |
PKC活性檢測(cè)實(shí)驗(yàn) | 非標(biāo)定量實(shí)驗(yàn) (Label-free)
| DIGE技術(shù)實(shí)驗(yàn)服務(wù) | 端粒酶活性檢測(cè)實(shí)驗(yàn) |
細(xì)胞生長曲線的測(cè)定 | 掃描電鏡服務(wù) | NF-KB p65活性檢測(cè)實(shí)驗(yàn)
| 慢病毒包裝實(shí)驗(yàn)服務(wù) |